轉(zhuǎn)氫酶1測試盒

商品詳情：
測定意義：TH位于線粒體的內(nèi)膜上，又稱為呼吸電子傳遞鏈復(fù)合體六，催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化。催化正向反應(yīng)稱為TH-1。線粒體NADH含量增加時會導(dǎo)致線粒體膜的H+電化學(xué)梯度升高，因而促進(jìn)了電子傳遞鏈上ROS的產(chǎn)生。TH-1促進(jìn)NADH轉(zhuǎn)換為NADPH，從而提高線粒體的抗氧化能力。

測定原理：NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代NADP+，TH-1催化 APADP+還原生成的APADPH在375nm有特征光吸收，因此通過測定375nm光吸收增加速率，來計算TH-1活性。需自備的儀器和用品：可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.血清等液體：直接檢測。

計算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

角化蛋白ELISA試劑盒 CNFN免費(fèi)代測試劑

角化不良蛋白ELISA試劑盒 DKC免費(fèi)代測試劑

角蛋白81ELISA試劑盒 KRT81免費(fèi)代測試劑

角蛋白8ELISA試劑盒 KRT8免費(fèi)代測試劑

角蛋白7ELISA試劑盒 KRT7免費(fèi)代測試劑

角蛋白6CELISA試劑盒 KRT6C免費(fèi)代測試劑

角蛋白6BELISA試劑盒 KRT6B免費(fèi)代測試劑

角蛋白6AELISA試劑盒 KRT6A免費(fèi)代測試劑

角蛋白5ELISA試劑盒 KRT5免費(fèi)代測試劑

角蛋白40ELISA試劑盒 KRT40免費(fèi)代測試劑

角蛋白4ELISA試劑盒 KRT4免費(fèi)代測試劑

角蛋白33AELISA試劑盒 KRT33A免費(fèi)代測試劑

角蛋白3ELISA試劑盒 KRT3免費(fèi)代測試劑

角蛋白20ELISA試劑盒 KRT20免費(fèi)代測試劑

角蛋白2ELISA試劑盒 KRT2免費(fèi)代測試劑
轉(zhuǎn)氫酶1測試盒-N-脫甲基酶(ERND)測試盒/微量法100T/48S

琥珀脫氫酶(SDH)測試盒/比色法50管/48樣

琥珀脫氫酶(SDH)測試盒/分光光度法50管/48樣

琥珀脫氫酶(SDH)測試盒/微量法100管/96樣

花青素還原酶(ANR)測試盒/分光光度法50管/48樣

花青素還原酶(ANR)測試盒/微量法100管/96樣

氧化酶(XOD)測試盒/比色法50T/48樣

氧化酶(XOD)測試盒/分光光度法50管/48樣

氧化酶(XOD)測試盒/微量法100管/96樣
注意事項：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。